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山東錦(jǐn)泰環淨液體葡萄糖(táng)檢測方法

瀏(liú)覽量:729 來源:山東錦泰環境 時間(jiān):2023-10-18 15:23:54

信息摘要:

發酵過程常見工業葡萄糖檢測方法,如菲林滴定法、氧化酶一偶聯比色法(GOD POD法) 、氣相色(sè)譜法 、高效液相色譜法,旋光(guāng)法、生物傳感器法(fǎ)。

發酵過程常見工業(yè)葡萄糖檢測方法,如菲(fēi)林滴定法、氧化(huà)酶一偶(ǒu)聯(lián)比色法(GOD POD法(fǎ)) 、氣相色譜法 、高效液相色譜法,旋(xuán)光法、生物傳感(gǎn)器法。
菲林滴定法
原理:還原糖可(kě)以將菲林試劑中的(de)二價銅離子還(hái)原為一價銅離子,反應終點可以 由次甲基蘭指示(shì)(藍色消失形成磚紅色),根據一定量的(de)菲林試劑完全還原所需的還原糖量,可計算加入樣品中的(de)還原糖的含量(liàng)。
1.試劑 菲林試劑甲液:稱取69.3g硫酸銅晶體(tǐ),用蒸餾水溶(róng)解,定容至1000ml 菲林試劑乙液:稱取346g酒石酸鉀鈉,100g氫氧(yǎng)化鈉,用蒸餾水溶解定容至1000ml 次甲基藍溶液:1g次甲基藍溶於100ml水
2.儀器 水浴鍋。
特(tè)點(diǎn):手工操作,過(guò)程複雜,受到多種因素幹擾,但是成本較低,所以目前仍為多數企業采用。
通(tōng)過原理可以(yǐ)分析出本(běn)方(fāng)法檢測結果其實是還原糖,而非絕對的(de)葡萄(táo)糖量。
氧化酶一偶聯比色法(fǎ)
GOD-POD法(fǎ)即葡萄糖氧化酶法,可以用來測定葡萄糖。葡萄糖氧(yǎng)化酶(méi)(glucose oxidase,GOD)利用氧和水將葡萄糖氧化為葡萄(táo)糖酸,並釋放過氧化氫。過(guò)氧化物(wù)酶(peroxidase,POD)在色(sè)原(yuán)性氧受(shòu)體存在時(shí)將過氧化氫分解為水和氧,並使色原性氧受體 4-氨基安替比林和酚去氫縮合(hé)為(wéi)紅色醌類化合物,即Trinder反(fǎn)應。紅色(sè)醌類化合物的生成量與葡萄糖含量成(chéng)正比。這一方法目前在臨床上用於診斷糖尿病(bìng)。由於可(kě)自動化操作,因此未來也可能應用於發酵液的檢測。
HPLC法
莫海濤等建立了同時測定葡萄糖、蔗糖、麥芽糖和乳糖(táng)的高效液相(xiàng)色譜方法。樣品經水超聲波浸取,采用Hypersil NH2柱(zhù)分離,流動相為乙晴/水(二者體積比為80:20),用激光蒸發光散射(shè)檢測器檢測。結果表明:四(sì)者的線性(xìng)範圍分別(bié)為(wéi)15~1 000,20 --1500,15~1000,12~1 000mg/L,檢出限為4.5~6.0 mg/L,樣品的加標平均回收率為92.9%~99.0%,相對標準偏差為1.9%~3.5%。與前者相比,HPLC檢測的準確度和專一性更高。
旋光(guāng)度法
在葡萄糖濃度與(yǔ)旋光度值的線性關係的考察中(zhōng),精密稱取適量經98~100℃幹燥至恒重的純葡萄糖,加水溶(róng)解並稀釋,按(àn)照旋(xuán)光光度法測定,旋(xuán)光度a對濃度C回歸(guī),得到(dào)的回歸方(fāng)程。結果表明:當葡萄糖質量濃度為(wéi)15.58~103.84 g/L時,具有良好的線性 關(guān)係。
生物傳感器法
葡萄糖(táng)生物傳感器的工作原理如下:葡萄糖首先在GOD催化作(zuò)用(yòng)下生成(chéng)過氧化氫,過氧化(huà)氫在(zài)過氧化物酶(HRP)的催化作用下,將2價(jià)還原態電介質Os氧化成Os3+,氧化態電介(jiè)質Os3+在較低(dī)工作電壓下被還(hái)原,產生的還原電流與被測葡萄糖濃度呈線性(xìng)關 係,通過檢測還原電流即可得到對應葡萄糖濃度。
氣(qì)相色譜法
采用(yòng)氣相色譜分析萄萄糖等多羥基化合物時,由於(yú)多羥基化合物極性大、沸點高,直接進樣分(fèn)析無法進行,所以多采用矽醚化試劑與羥基反應,生成易揮發、低極性(xìng)、高(gāo)穩定性的三甲基矽醚衍生物(wù),再進行氣相色譜分(fèn)析。

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